江苏宠物医院PCR检测技术

PCR(PolymeraseChainReaction)是一种复制核酸片段并提高DNA产量的技术，即所谓的聚合酶链式反应，这种技术可以在数小时内大量复制特定的基因片段。由于其高敏感性和高特异性的特点，PCR技术被应用在宠物疾病分子的诊断上，将从疑似患病宠物（血液、眼鼻分泌物、粪便，尿液或腹水）中采样的极微量病原(细菌、病毒或寄生虫)特定核酸片段样本，透过PCR的方式大量被复制，再以核酸电泳的方式判读结果，从而获得早期、快速、稳定和准确的诊断结果.巧亦捷采用的薄膜微流控技术与核酸检测技术相结合，特别适用于基因表达和病原体检测等领域。江苏宠物医院PCR检测技术

巧亦捷核酸一体机采用的探针法荧光PCR与常规PCR的不同之处在于：在上、下游引物外还加入了具有序列特异性的探针（探针本身具有荧光标记），该探针根据需要扩增的靶序列设计因此只能与待检测序列结合，与染料法相比提高了实验的特异性。目前市场上的探针主要种类有：TaqMan、MolecularBeacon、Scorpions、Hybirdization等，其中以TaqMan探针应用宽泛。TaqMan探针的结构：长度与普通PCR引物类似，大约20bp左右。在5’与3’端各标记有一个荧光基团，5’的荧光基团称为报告基团（Report），3’的荧光基团称为淬灭基团（Quencher）。TaqMan探针的性能：在探针结构完整的情况下用特定的波长激发报告基团，由于报告基团与淬灭基团的空间位置很近，因此报告基团能够通过FRET（FluorescenceResonanceEnergyTransfer）将接受的能量转移到淬灭基团，使后者以发射荧光或热量的方式释放能量，而报告基团并不发射特定波长的荧光信号。苏州便携式PCR动物医疗巧亦捷核酸一体机配套检测试剂覆盖动物诊疗中常见的犬、猫、猪、牛、水产等病原体核酸检测。

市面上现有PCR仪器都有以下几个弊端：1.由于PCR灵敏度极高，实际应用中污染较严重，一旦有少量外源性污染就可出现假阳性结果。2.条件控制不当会造成各种产物突变，从而降低特异性和灵敏度。3.PCR技术需要以已知DNA模板作为扩充模板，必须知道引物的结合部位序列才能合成特异性引物，局限性较大。巧亦捷核酸一体机采用薄膜微流控技术，检测过程为全封闭且自动进行核酸提取及PCR扩增，无需高标准的检测环境，可很大程度上降低污染。结果快速、准确且稳定。

巧亦捷核酸检测一体机有以下几点优势：1：全自动核酸提取:＜1分钟的手工操作时间：巧亦捷核酸一体机内部可自动进行封闭式核酸提取，使得整体手工操作时间小于1分钟，较为小化人为干预带来的操作误差，是市面上自动化程度比较高的多重病原体解决方案。2、准确、灵敏的创新核酸检测针对不同的样本，可以准确地实现从样本到结果的判读，可以处理全血、血清、血浆、粪便、体液、分泌物等各种样本，实现医学界公认的高特异性、高敏感性核酸检测3、一份样本多重检测基于实时荧光定量PCR技术的多种综合症检测系统，一份样本较为多可以同时检测多种病原体，这一特性赋予该系统优越多样性的检测和应用，也便于快速进行多种疾病的同时检测和管理无论是由病毒、细菌，还是原虫、寄生虫等引起的犬猫传染性疾病都可利用巧亦捷核酸一体机进行诊断。

巧亦捷全自动薄膜微流控快速核酸检测一体机对比市场上其他竞品来说有以下几点优势：（1）1分钟完成操作，无需专业技术人员。宠物医院实验人员均非分子诊断技术人员，无分子实验操作经历，操作步骤繁琐极容易导致人为因素假性临床结果。高程度自动化的核算一体机能有效改善这一痛点。（2）45分钟内完成扩增检测，减少患宠等待时间。宠物医生需要快速诊断报告协助诊疗，而且过长的诊断时间也将影响医院提供诊疗服务的数量。（3）全流程封闭检测+封闭试剂，简化操作流程，有效防控气溶胶污染和样本交叉污染。传染病诊断也类似于刑侦，就是在患者的样本中查找引起症状的元凶——病原微生物。苏州分子检测PCR仪器

巧亦捷希望能更好的去为每一只动物提供专业的检测服务。江苏宠物医院PCR检测技术

PCR的工作原理：在TaqDNA聚合酶（热稳定DNA聚合酶）的作用下，由一对特异性引物经热变性-退火-延伸反应，三个不同温度的循环处理使得DNA由少量扩增到多量的一种体外DNA扩增技术。在反应体系内，以一对人工合成的寡核苷酸作为扩增引物，第一步，模板DNA变性，以构成脱氧核糖核酸的四种脱氧核苷酸为底物，目的基因作为模板，在DNA聚合酶的作用下模板DNA经过80-90℃高温变性，使模板DNA双链经PCR扩增形成的双链解离成单链。第二步，模板DNA与引物退火（复性），模板DNA解离成单链后温度降至50-60℃，引物与模板DNA单链互补配对。第三步，引物的延伸，DNA模板-引物结合物在DNA聚合酶作用下，70-75℃以dNTP为反应原料半保留复制合成一条新的模板DNA链。这三个步骤为一个循环，2-4分钟即可完成一个循环，2-3小时就能使极微量的DNA、片段、甚至单拷贝基因复制到几百万倍，从而实现对靶DNA的放大。由于扩增碱基序列按照靶DNA复制，因此PCR反应具有高度特异性。江苏宠物医院PCR检测技术